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一般描述
使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)和经修改的已发表的实验方案将链霉亲和素与辣根过氧化物酶(HRP)偶联,以形成1:1结合物。HRP的分子量约为44kDa,链霉亲和素的分子量约为60kDa。更多内容到默克sigma试剂官网查看:www.sigmaaldrich.cn
链霉亲和素被视为一种高亲和力的生物素结合剂,对极端pH值、去污剂温度、变性剂和酶均具有抗性,因此被用于分子生物学和生物纳米技术。
链霉亲和素的名称源自其细菌来源 Streptomyces avidinii ,以及鸡的卵清蛋白,亲和素,其对生物素具有高亲和力。其同源核心与亲和素具有33%的序列相似性,并且具有相同的四聚体结构。它是一种结晶四聚体蛋白质,分子量为4 * 15000Da。它可结合四个生物素分子。链霉亲和素缺少碳水化合物和含硫氨基酸。
应用
来自 Streptomyces avidinii 的链霉亲和素-过氧化物酶已用于ELISA(酶联免疫吸附试验) 和酶联免疫斑点测定(ELISPOT)中。
来自 Streptomyces avidinii 的链霉亲和素-过氧化物酶可在标准ELISA检测、 免疫印迹、 和免疫细胞化学 实验过程中,用作生物素化抗体的二级试剂。
生化/生理作用
链霉亲和素是一种抗生素,其可通过结合并消耗周围环境中的必需维生素生物素起作用。由于其独特的性质,链霉亲和素已用于生物学研究的各种应用,包括免疫疗法、免疫检测、杂交检测、淋巴细胞活化、抗原定位和亲和层析。
包装
基于蛋白含量进行包装
外形
含有柠檬酸盐缓冲盐的冻干粉末。
制备说明
通过改良O′Sullivan, M.J., et al., FEBS Lett., 95, 311 (1978).
中所报道的实验方法,使用VI型过氧化物酶进行标记。通过亲和层析进行纯化。
分析说明
应使用1 mg/mL溶于缓冲液中的储备液进行一系列稀释,凭经验确定最佳工作稀释度。
高夕东
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